Hi- Primers介紹

  精準(zhǔn)醫(yī)學(xué)時代，靶向特異區(qū)段重測序的需求日益增加，樣本量常達(dá)上千個，只用傳統(tǒng)的Sanger法或目標(biāo)區(qū)域雜交捕獲測序價格昂貴。因此基于超高重PCR的擴(kuò)增子捕獲測序應(yīng)對該區(qū)段范圍適用性強(qiáng)，針對連續(xù)區(qū)段，外顯子靶標(biāo)以及客戶指定位點(diǎn)，特異設(shè)計(jì)優(yōu)化捕獲引物，多重PCR一次捕獲所有位點(diǎn)，提供預(yù)混引物以及反應(yīng)試劑，方便客戶自行實(shí)驗(yàn)。

  上海翼和生物超高重PCR建庫技術(shù)，利用自主開發(fā)的多重PCR引物設(shè)計(jì)軟件，結(jié)合知識密集型的多重PCR優(yōu)化技術(shù)，克服擴(kuò)增效率不均一問題，保證每個擴(kuò)增子間拷貝數(shù)的均一性(利用ABI 7900定量PCR檢測多重PCR產(chǎn)物，根據(jù)ct值判讀產(chǎn)物濃度，確保產(chǎn)物間的均一性)。

  使用超高重PCR建庫試劑盒Hi- Primers，在建庫過程中引物端自動加上區(qū)分樣本barcode，無需二次建庫，兩輪PCR完成整個建庫過程。試劑盒內(nèi)容包含：靶向捕獲特異性引物Mix，測序平臺定制接頭，純化試劑，擴(kuò)增反應(yīng)體系等。只需擁有自己的測序平臺，Hi- Primers幫您完成建庫所有問題。

  應(yīng)用領(lǐng)域：孟德爾遺傳性疾病的篩查和診斷，精準(zhǔn)醫(yī)療研究與應(yīng)用等。

  試劑盒適用測序平臺

  Hi- Primers建庫流程示意圖

  試劑盒定制流程

  引物設(shè)計(jì)：根據(jù)客戶需求(對連續(xù)區(qū)段，外顯子靶標(biāo)以及客戶指定位點(diǎn))，基于超高重PCR的擴(kuò)增子捕獲測序，利用上海翼和生物自主開發(fā)的引物設(shè)計(jì)軟件，設(shè)計(jì)特異性捕獲引物。

  引物優(yōu)化：利用多重PCR引物優(yōu)化技術(shù)，使擴(kuò)增子間均一性好，保證每個擴(kuò)增子間拷貝數(shù)差異控制在平均深度的5~10倍以內(nèi)(利用ABI 7900定量PCR檢測多重PCR產(chǎn)物，根據(jù)ct值判讀產(chǎn)物濃度，確保產(chǎn)物間的均一性)，90%擴(kuò)增子reads數(shù)大于15，不浪費(fèi)測序通量。

  試劑盒組成：試劑盒包含包含從擴(kuò)增到建庫到測序前純化所用到的所有內(nèi)容，購買一個試劑盒即可完成整個建庫過程。

  試劑盒內(nèi)容組成

  試劑盒參數(shù)

  試劑盒實(shí)驗(yàn)流程