什么是線粒體?
線粒體兩種狀態(tài):細(xì)胞內(nèi)和游離
1.細(xì)胞內(nèi)線粒體
細(xì)胞內(nèi)mtDNA 拷貝數(shù)變異引起線粒體功能紊亂, 與衰老及多種疾病如糖尿病、心血管疾病、神經(jīng)系統(tǒng)疾病和腫瘤等密切相關(guān)。
2. 游離線粒體
l 外周血游離線粒體DNA (ccfmtDNA)與癌癥之間顯著相關(guān),可作為一種非侵襲性的潛在適用性較大的腫瘤標(biāo)志物。
l 血漿游離 mtDNA 拷貝數(shù)與燒傷病情相關(guān)指標(biāo)(燒傷面積?燒傷指數(shù))呈正相關(guān)
l ccf-mtDNA水平與抑郁和失眠等合并癥呈正相關(guān)
檢測(cè)原理
細(xì)胞mtDNA檢測(cè)原理:雙色熒光TaqMan探針?lè)ǘ?/span>PCR技術(shù),FAM熒光根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算線粒體拷貝數(shù),VIC熒光根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算細(xì)胞數(shù)目。(標(biāo)準(zhǔn)曲線A+B )
標(biāo)準(zhǔn)曲線A(線粒體通道FAM)
標(biāo)準(zhǔn)曲線B(內(nèi)參通道VIC)
游離mtDNA檢測(cè)原理:雙色熒光TaqMan探針?lè)ǘ?/span>PCR技術(shù),FAM熒光根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)
算線粒體拷貝數(shù),VIC熒光質(zhì)控游離基因組DNA抽提是否合格(標(biāo)準(zhǔn)曲線A)
特色與優(yōu)勢(shì)
l TaqMan探針?lè)ǎ瑴?zhǔn)確度優(yōu)于SYBRGreen法。
l 雙重?zé)晒?,提高檢測(cè)效率,減小孔間差,結(jié)果更穩(wěn)定。
l 多重反應(yīng),減少試劑用量,性價(jià)比更高。
l 一個(gè)試劑盒檢測(cè)兩種狀態(tài)線粒體CNV。