擴(kuò)增子建庫技術(shù)是當(dāng)前NGS建庫的主流技術(shù),高循環(huán)的PCR擴(kuò)增反應(yīng)帶來產(chǎn)物的非均一性擴(kuò)增,導(dǎo)致最終各區(qū)段測序深度產(chǎn)生較大偏差。
本試劑盒通過第一輪低循環(huán)多重PCR捕獲目標(biāo)區(qū)段和產(chǎn)物純化,第二輪PCR擴(kuò)增,第三輪建庫PCR,最終構(gòu)建高質(zhì)量的、均一的NGS測序文庫。
圖1.1.1 NGS多重PCR建庫技術(shù)流程圖
產(chǎn)品優(yōu)勢
(1)引物設(shè)計(jì)簡單,按照引物設(shè)計(jì)原則設(shè)計(jì)的引物,均可適用,無需修飾;
(2)多重引物混合物制備方便:各引物濃度不需要調(diào)整,1:1等體積混合即可;
(3)操作簡便,全程實(shí)驗(yàn)操作時(shí)間不超過6小時(shí);
(4)適用范圍廣,單管可完成30—1000重?cái)U(kuò)增;
(5)支持多樣本整體制備文庫,一次可處理數(shù)百樣本;
(6)單個(gè)多重PCR反應(yīng),均一性擴(kuò)增子可達(dá)到80%-90%;兩管多重PCR反應(yīng)(即在單個(gè)多重PCR反應(yīng)的基礎(chǔ)上,增加一個(gè)補(bǔ)充反應(yīng)管,擴(kuò)增前一個(gè)反應(yīng)中效率低的多個(gè)區(qū)段),均一性擴(kuò)增子可達(dá)到95%以上。(均一性擴(kuò)增子:擴(kuò)增子的測序深度大于等于20%的平均測序深度。)
(7)文庫覆蓋率達(dá)到95%以上
(8)完善的質(zhì)控方案,實(shí)驗(yàn)過程可控。
產(chǎn)品儲(chǔ)存及運(yùn)輸
低溫冷凍運(yùn)輸, -20℃保存,有效期 6個(gè)月;凍融以后,4℃保存,有效期1周;磁珠4℃保存,有效期 6個(gè)月。